I. Introduction
生物安全柜是为使用者、样品和环境提供防范生物危害保护的主要工程控制设备。生物安全柜的气流由流入屏障组成,可防止生物危害从安全柜工作区域意外释放。它还具有下沉气流,可去除工作区域的污染物,为样品提供无菌区域。
应根据以下标准选择生物安全柜:工作类型、生物危害分类(危险度 1-4 级);人员防范放射性核素和挥发性有毒化学品暴露的保护;或这些因素的组合。下表显示了针对每种保护类型推荐的生物安全柜。
保护类型 | 生物安全柜选择 |
人员保护,危险度 1-3 级微生物 | I级、II级、III级生物安全柜 |
人员保护,危险度 4 级微生物,手套箱实验室 | III级生物安全柜 |
人员保护,危险度 4 级微生物,防护服实验室 | I级、II级生物安全柜 |
产品保护 | II级、III级生物安全柜 |
防范挥发性放射性核素/化学品,再循环至工作区 | II级 B1 型、连接管道的 II级 A2 型 |
防范挥发性放射性核素/化学品,不再循环至工作区 | I级、II级 B2 型、连接管道的 III级 |
来源:《实验室生物安全手册》。第 3 版(修订版)。临时指南。世界卫生组织。第 52 页.
Esco Lifesciences 是生物安全柜领域的全球领导者,提供业内最广泛的产品系列,在全球 100 多个国家的顶级实验室中拥有数以千计的安装实例。与其他任何产品相比,Esco 生物安全柜在更多国家、以更多语言获得了更多独立认证,展示了我们对业内最佳安全与品质的承诺。
I级生物安全柜
I级生物安全柜具有当今所有可用生物安全柜中最基本和最基础的设计。它为操作人员和环境提供防范生物危害暴露的保护,适用于处理分配给生物安全等级 1、2 和 3 级的微生物制剂。
II级 A2 型生物安全柜
II级 A2 型生物安全柜是最常见的 II 级生物安全柜。它也是所有不同可用类型中最常见的生物安全柜。它具有一个静压箱,其中 30% 的空气被排出,70% 作为下沉气流再循环到工作区域。它保护操作人员和环境免受生物危害暴露,并保护产品免受污染的室内空气和交叉污染。
如果使用痕量有毒化学品作为微生物过程的辅助手段,则 A 型安全柜应连接排气管道。
II级 B2 型生物安全柜
II级 B2 型生物安全柜设计为在安全柜内无再循环。流入和下沉空气在经过 HEPA 过滤后排出到外部环境。由于没有再循环,B2 型生物安全柜适用于处理作为微生物过程辅助手段的有毒化学品。理论上,B2 型生物安全柜可被视为所有 II 级安全柜中最安全的,因为如果下沉和/或排气 HEPA 过滤系统停止正常运行,全排气功能将起到故障安全保护作用。
III级生物安全柜
III级生物安全柜提供了绝对的安全水平,这是 I 级和 II 级生物安全柜无法达到的。它适用于处理分配给生物安全等级 1、2、3 和 4 级的微生物制剂。它通常用于涉及最致命生物危害的工作。
II. Biosafety Cabinet Guide to models
| 产品 | 型号代码 | 应用领域 | 分类 | 认证标准 | 结构材质 | 控制系统 | 选配配件 | 产品特色 | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 主体外壳 | 侧壁 | 工作台面 | 风机 | ||||||||
| AC1 | 提供针对生物危害的 操作人员和环境防护 | I级生物安全柜 | 符合 EN 12469, 符合 SANS 12469 | 覆有 Isocide™ 抗菌涂层的电镀锌钢板 | 钢化玻璃 | 一体式 不锈钢台面 | 单风机配置, DC ECM | Sentinel™ Gold 微电脑控制系统 | 二级活性炭滤网, UV 紫外防护门板(带 VHP 接口), 外排管道 | 90° 可翻转前窗 便于工作区清洁与物品进出 | |
| Airstream® II级 A2 型安全柜 - NSF认证 | AC2-NS | 保护操作人员与环境免受生物危害,同时提供洁净无菌的操作区域以杜绝样品污染。 | II级 A2 型生物安全柜 | 获得 NSF 49 认证 | 不锈钢 | 一体式 不锈钢台面 | 单风机配置, DC ECM | 倾斜排污积液槽, 可选 H2O2 接口, 二级活性炭滤网 | 单风机同时驱动流入与沉降气流,节能且经济高效 | ||
| Airstream® 第三代 II级安全柜 - E 系列 | AC2-E | II级生物安全柜 | 获得 PHE 的 EN 12469 认证 | 钢化玻璃 | 多块拼接式不锈钢台面 | 单风机配置, DC ECM | 钢化玻璃侧窗提高通透视野 消除操作时的压抑感 | ||||
| Airstream® 第三代 II级安全柜 - S 系列 | AC2-S | 获得 PHE 的 EN 12469 认证 | 不锈钢 | 一体式 不锈钢台面 | 单风机同时驱动流入与沉降气流,节能且经济高效 | ||||||
| Airstream® 第三代 II级安全柜 - D 系列 | AC2-D | 符合 EN 12469 标准 | 不锈钢 | 一体式 不锈钢台面 | 双排风机系统, DC ECM | 双风机驱动系统,冗余设计在单个风机故障时仍能保持安全防护 | |||||
| Airstream® 第三代 II级安全柜 - G 系列 | AC2-G | 符合 EN 12469 标准 | 钢化玻璃 | 多块拼接式不锈钢台面 | |||||||
| Airstream® II级安全柜 TUV-Nord - E 系列 | AC2-E-TU | II级生物安全柜 | 获得 TUV-Nord 的 EN 12469 认证 | 钢化玻璃 | 多块拼接式不锈钢台面 | 双排风机系统, DC ECM | VHP 消毒接口, 外排风管道 | 独特的不锈钢与玻璃复合侧壁增加视野通透感,圆弧边角更易于消毒清洁。 | |||
| Airstream® II级安全柜 TUV-Nord - S 系列 | AC2-S-TU | 不锈钢 | 一体式 不锈钢台面 | ||||||||
| Labculture® II级 A2 型安全柜 | LA2-A-E | II级 A2 型生物安全柜 | 获得 NSF 49 认证, EN 12469, UL 61010, JIS K3800 及 CFDA YY-0569 认证 | 不锈钢 | 一体式不锈钢台面 | 单风机配置, DC ECM | 外排风管道 | 高效节能、人体工学设计、运行平稳静音、获得多国权威认证 | |||
| Airstream® II级 B2 型全排安全柜 | AB2 | II级 B2 型生物安全柜 | 符合 NSF 49, EN 12469, CFDA YY-0569* *CFDA 认证仅适用于中国市场销售的 AB2 型号 | 不锈钢 | 一体式 不锈钢台面 | 单个 EBM 品牌风机 | Sentinel™ Silver 微电脑控制系统 | 二级活性炭滤网, VHP 消毒接口 | 故障安全保护系统 | ||
| Labculture® II级 B2 型全排安全柜 | LB2 | II级 B2 型生物安全柜 | 获得 NSF 49 认证 | 不锈钢 | 一体式 不锈钢台面 | 单风机配置, DC ECM | Sentinel™ Gold 微电脑控制系统 | 防回流止回阀, 初效预过滤网 | 高效节能环保 | ||
| Airstream® III级生物安全柜 | AC3 | 具备绝对气密防护性能,专为处理极高致死率的危险生物介质提供最高安全保障。 | III级生物安全柜 | 符合 EN 12469 标准 | Isocide™ 涂层电镀锌钢板 | 一体式 不锈钢台面 | 双 ECM 风机配置 | Sentinel™ Silver 微电脑控制系统 | 外排风管道 | 独家双级排风过滤系统,提供比单级过滤高出 >100,000 倍的防护等级 | |
III. Must-have features of a BSC
Esco 生物安全柜确保对生物危害的有效遏制
遏制(Containment)是指安全柜/防护罩将所有危险颗粒完全控制在工作空间内而不通过安全柜前部泄漏的能力。在现场和制造后测试生物安全柜遏制能力最受认可的方法是通过 KI-DISCUS 测试。应当指出的是,安全柜可能通过所有气流测试,但在遏制测试中仍然可能失败。
Esco Lifesciences 是欧洲以外少数具备 KI-DISCUS 测试能力的公司之一。此外,我们所有的生物安全柜均已使用该方法进行了型式检验并获得了遏制认证。除 KI-DISCUS 外,还采用了诸如产品保护和防交叉污染保护测试等微生物测试。这些测试确定:
在微生物应用过程中形成的气溶胶能否有效地控制在生物安全柜内,
外部污染物是否无法进入工作区域,
气溶胶对其他设备的污染能否得到有效最小化。
Esco 生物安全柜特点:
符合 NSF49 或 EN 12469 标准
负压侧壁有助于防止污染物泄漏
抗穿刺金属静压箱,抗撕裂和泄漏以实现更安全的操作
提供更好过滤效率的 ULPA 或 H14 过滤器
表面抗菌涂层可抑制微生物生长并提高安全性
DC-ECM 风机提供更安静的运行、更少的热量排放并降低能源成本
向下倾斜且居中的控制系统,为操作人员带来舒适感
显示生物安全柜参数的直观控制系统
具有针对不安全状况(如气流故障和前窗警报)的声光警报。
IV. Factors to Consider When Selecting a Biosafety Cabinet
根据生物安全等级进行选择
生物安全等级是实验室中遏制或隔离有害传染源的措施。对于有害物质的风险评估,生物安全官员(BSO)和机构生物安全委员会(IBC)可能会有所帮助。共有四个生物安全等级:
生物安全 1 级适用于本科和中等教育培训、教学实验室以及使用非致病性微生物的其他实验室。示例包括枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、格氏阿米巴原虫(Naegleria gruberi)和传染性犬肝炎病毒。因此,BSL-1 遏制只需要一个用于洗手的水槽。
生物安全 2 级适用于处理与人类疾病相关且存在于社区中的本土中度危险因子的临床、诊断、教学和其他实验室。示例包括乙型肝炎病毒、HIV、沙门氏菌(Salmonella)和弓形虫(Toxoplasma)。只要气溶胶产生量低,这些微生物就可以在开放式实验台上使用。危害可能通过摄入微生物或粘膜暴露于微生物而发生。在处理受污染材料(即尖锐物体)时应采取某些预防措施。同样,涉及气溶胶的操作程序应在生物安全柜或安全离心机杯中进行。个人防护装备与洗手池和废物消毒设施配合使用也是有效的。
生物安全 3 级适用于处理具有呼吸道传播潜力的本土或外来物质的临床、诊断、教学、研究或生产机构,这些物质可能是导致致命感染的原因。示例包括结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、圣路易斯脑炎病毒和贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)。危害可能通过自我接种、摄入以及暴露于感染性气溶胶而发生。为了实现遏制,操作程序应在生物安全柜或气密性气溶胶发生室中完成。通风系统也应适当,以减少危险气溶胶的释放。
生物安全 4 级适用于可能通过气溶胶途径传播且无可用疫苗或治疗手段的危及生命的危险物质或病原体。示例包括马尔堡病毒或刚果-克里米亚出血热。危害可能通过感染性气溶胶、皮肤黏膜接触危险飞沫以及自我接种而发生。为了完全隔离传染因子,操作程序应在 III 级生物安全柜中进行,或在穿着全身供气正压个人防护服时进行。BSL-4 实验室位于一个具有专门通风和废物管理系统的隔离园区内。实验室的全部运行应由实验室主任管理。对此的补充将是训练有素的实验室人员、安全措施/手册、安全设备、设施的适当设计、个人防护设备以及生物安全等级规范的存在。
| 致死性 | 媒介 | 治疗方案 | 示例 | |
|---|---|---|---|---|
1 |
安全 |
液体 |
有 |
Bacillus subtilis |
2 |
中等 |
液体 |
部分有 |
HIV |
| 3 |
严重 |
气溶胶 |
部分有 |
TBC |
4 |
极度 |
气溶胶 |
无 |
Ebola |
根据过滤系统进行选择
生物安全柜最重要的组件之一是过滤器。目前,生物安全柜使用的过滤器有两种:
- 在 MPPS(通常在 0.30 微米)下效率为 99.99% 的高效颗粒空气(HEPA)过滤器。
- 在 MPPS(通常在 0.12 微米)下效率为 99.999% 的超低穿透空气(ULPA)过滤器。
ULPA 过滤器的效率比 HEPA 过滤器高 10 倍,因此配备 ULPA 过滤器的生物安全柜可以提供更好的操作人员、产品和环境保护。
根据阻挡进风格栅的可能性进行选择
操作人员和产品保护是通过流入和进入前空气格栅的下沉气流所产生的气幕来实现的。使用者需要选择一种能够防止操作人员手臂或样品意外阻塞格栅的生物安全柜设计。
有几种方法可以防止进风格栅阻塞:
- 使用抬高的扶手。
- 将扶手放在进风格栅上方
- 将进风格栅向上弯曲(如 A 形)
- 将进风格栅向下弯曲(如 V 形)
- 将进风格栅放置在低于安全柜前突缘和工作托盘的位置
图 1. 抬高的扶手与弯曲进风格栅的组合,以防止意外阻塞。
根据气流报警进行选择
生物安全柜使用的报警和控制系统有不同的可能性:
- 简单开关 – 最简单的控制系统,带有打开和关闭风机与照明的按钮。具有指示气流故障的声光警报。
- 模拟显示 – 显示气流速度并提供有关当前速度距离故障点有多远的概览。
- 数字微处理器 – 显示安全柜的基本参数,从气流值到前窗状态和警报。它具有用于安全柜操作的易于使用的按钮和一个 LCD 屏幕,使用户能够诊断安全柜的状态并对不同的功能进行编程,例如设置实验计时器。
根据前窗机构、材质和角度进行选择
生物安全柜具有不同的窗户机构,使用者必须在不影响遏制性能的情况下选择最方便的类型。
- 铰链窗。优点是由于其固定,很容易获得标称孔径开启高度。但是,当紫外线灯打开时,操作人员必须安装可选的前盖来覆盖开口。
- 手动移门窗。操作人员必须遵守正确的标称窗口开启高度,如导向标记所示并由前窗报警支持。在激活紫外线灯之前,必须完全关闭移门窗。
- 电动移门窗。这类似于手动移门窗版本,但使用者只需按下一两个按钮即可移动窗户。通常,为了安全起见使用两个按钮,以确保操作人员的双手都在移动窗户的路径之外。
图 2:破碎的钢化玻璃前窗样本照片。
钢化玻璃或夹层安全玻璃是生物安全柜前窗的理想材料。大多数钢化玻璃都能吸收紫外线,清晰,并在破碎时保持其形状,以避免任何遏制失效或事故。
前窗可以是垂直窗或倾斜窗。垂直窗更容易设计,但会给操作人员带来眼睛疲劳。现代生物安全柜具有倾斜的前部或斜面,以提供更好的能见度,同时最大限度地减少眩光和反射。
根据工作托盘进行选择
为了安全起见,生物安全柜的表面需要在每次使用前后或发生大量溢出后进行消毒。因此,易清洁性因素在选择生物安全柜时起着重要作用:
-
单件式工作托盘
单件式工作托盘具有凹陷区域,有助于容纳溢出物。由于其无缝设计,溢出物不会向下滴落。然而,清洁更具挑战性,因为它比多件式托盘更重。
图 3. 生物安全柜的单件式工作托盘。
-
多件式工作托盘
分块工作托盘更轻且更易于抬起,使清洁更加方便。然而,由于存在分段,它无法有效地容纳溢出物。
图 4. 生物安全柜多件式工作托盘的分段。
根据人体工学进行选择
生物安全柜应配备符合人体工学的功能,因为这将提供舒适感并提高生产力。以下是选择生物安全柜时需要考虑的几个功能:
- 控制面板的位置和角度 - 控制面板必须位于安全柜的中间,在那里更容易看到和触及。同样重要的是,无论操作人员是站立还是坐着,都可以访问控制系统。
- 照明系统 - 安全柜的光照强度应超过 1000 勒克斯,以在工作区域提供足够的亮度,同时具有最小的眩光,以确保使用者的舒适感。
- 低噪音运行 – 生物安全柜不超过 67 dBA 是理想的。这将防止在操作过程中产生任何干扰。
- 紫外线灯的位置 – 紫外线灯不应直接放置在操作人员的视线范围内,以避免眼睛受到刺激。
V. Safety Tips When Using Biosafety Cabinets
关于如何在生物安全柜中正确工作的提示
生物安全柜用于处理致病性样品或用于需要无菌工作区的应用。它通过流入空气创建的气流屏障保护使用者免受生物危害。同时,安全柜内的样品也受到形成另一个气流屏障的下沉空气的保护。然而,生物安全柜的有效性仅取决于操作人员的使用方式。
以下是在生物安全柜中安全工作的一些提示:
- 切勿将生物安全柜与超净工作台混淆。
- 切勿将安全柜用于处理极度危险的介质。
- 如果任何报警被触发,切勿操作安全柜。
- 不应使用本生灯。
- 切勿将安全柜用作存放区域。
- 正确的安全柜摆放位置至关重要。
- 始终连续运行设备。
- 尽量减少对气流屏障的干扰。
- 安全柜必须每年进行认证。
- 遵守表面消毒规程。
- 留出气流自净周期时间。
- 遵守正确的前窗开启高度。
- 仅经过培训的人员方可使用安全柜。
- 穿戴恰当的工作服装。
- 在安全区域内进行操作。
- 遵守规范的无菌技术。